精子細胞の分離
ALSCellCelector™によるシングル精子細胞の自動分離
シングルの精子細胞の分離は、家族関係に関する質問を明確にするための遺伝子フィンガープリント、性的犯罪を明らかにするための法医学、および体外受精プロセスにとって重要です。
ここでは、ALSCellCelector™ を用いたシングル精子細胞の分離について説明します。
高精度のロボット技術と倒立顕微鏡の独自の組み合わせにより、ガラス毛細血管を使用したシングル精子細胞の検出と分離を自動化できます。時間のかかる手作業は、CellCelector™ システムを使用して標準化された条件に置き換えることができます。
シングルの精子細胞は、20倍の対物レンズを使用して明視野照明で観察および分離されました。
精子細胞のサイズは、物体を顕微鏡で測定するためのいくつかの特別なソフトウェア機能を使用して、約5 x 33 µmで決定されました。
見やすくするために、長方形のマークされた領域が拡大して示されています（右下）。
シングル精子細胞の検出
シングル精子細胞の検出は、ライブ画像画面上でマウスをクリックして手動モードで行うか、サンプルスキャン後に調整された検出パラメーター（直径、面積、伸びなど）のセットを使用して自動的に行うことができます。
基本的な検出は、グレー値の範囲を定義することによって行われます。ターゲットセルは、隣接セルおよびバックグラウンドから分離できます。
グレー値のしきい値がどのように設定されたかに応じて、単一の精子全体または精子細胞の頭部のみが検出されました。
シングルヒト精子細胞を自動的に検出するためのパラメーターの設定
さまざまな範囲のグレー値（AおよびB）により、参照画像（C）に基づいて精子のさまざまな部分（DおよびE、緑色でマークされた検出領域）を検出できます。
直径、面積、伸び（F）などの追加パラメーターを考慮すると、スキャン結果をさらに改善できます（G＆H）。
シングル精子細胞の分離
内径30µmのホウケイ酸ガラスキャピラリーを使用して、単一の精子細胞を分離しました。60 nlの液体を使用してセルの真上に吸引圧力を発生させることにより、セルを底部から取り外し、液体をガラスキャピラリーに浸しました。単離された精子細胞は、2x9ウェルのIbidi社スライドの別々のウェルに移されます。各シングル細胞の分離は、ピッキングプロセスの前後に撮影された画像によって自動的に文書化され、データベースに保存されます。
顕微鏡画像は、単一の精子細胞の分離の直前（左）と直後（右）に撮影されました。
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