CellCelector
CellCelector™: Das vielseitigste System zur automatisierten Isolierung von Einzelzellen und Zellkolonien
Die ALS CellCelector™ Plattform ist ein einzigartiges und vollautomatisches Zell-Imaging- und Pickingsystem, entwickelt für die Detektion, Selektion und Isolierung von Einzelzellen, Clustern, Sphäroiden und Organoiden sowie von Einzelzellklonen und adhärenten Kolonien. Es wird in einer Vielzahl von Forschungsbereichen eingesetzt (z.B. Screening von zirkulierenden Tumorzellen/CTC, Stammzellforschung sowie Zelllinienentwicklung und Antikörperentwicklung).
Technologie
Der CellCelector™ kombiniert ein automatisiertes inverses Fluoreszenzmikroskop mit einem Hochgeschwindigkeits-Scanningtisch, einem hochpräzisen mikrofluidischen Zellpickingroboter und einer PC-Workstation mit leistungsfähiger Bildverarbeitungssoftware, die alle Systemkomponenten zusammenfasst. Damit ist das System eine einzigartige Kombination aus einem High-Content Imaging System und einem vollautomatischen Mikromanipulationsroboter. Die einzigartige Vielseitigkeit des Systems wird durch drei austauschbare Pickingmodule erreicht, die entweder hochpräzise Glaskapillaren, wiederverwendbare (autoklavierbare) Edelstahlspitzen oder Einweg-Kunststoffspitzen verwenden. Weitere Vielseitigkeit wird durch die Kompatibilität mit einer großen Auswahl an Ausgangs- (Mikrotiterplatten, Petrischalen, Objektträger, CellCelector Nanowell Arrays oder kundenspezifische Platten) und Zielformaten (Mikroplatten, Petrischalen, Objektträger, PCR-Gefäße/Platten etc.) erreicht.
Beispiele automatisch aufgenommener Bilder vor (before picking) und nach (after picking) dem Picken einer einzelnen Zelle (Hellfeld, 10 x, PC3 Zelllinie)
Die Arbeitsweise des ALS CellCelector™ kann folgendermaßen zusammengefasst werden:
- Bildaufnahme der Probenplatte
- Detektion und Auswahl der gewünschten Zellen, Cluster oder Kolonien
- Isolierung dieser Zellen und Transfer in die Zielplatten
Der gesamte Arbeitsablauf ist vollständig automatisiert und wird komplett dokumentiert. Durch eindeutige IDs können die isolierten Zellen von der Ausgangs- bis in die Zielplatte verfolgt werden. Livebilder während des Pickprozesses, sowie Bilder vor und nach dem Picken der Zellen dokumentieren die erfolgreiche Isolierung der gewünschten Zielzellen.
Abhängig von der Anwendung und den Anforderungen des Benutzers können die zu isolierenden Zellen vollautomatisch entweder markierungsfrei auf Basis der Zielzellgröße und Morphologie oder mit Hilfe von positiven/negativen Fluoreszenzmarkern erkannt, identifiziert und selektiert werden. Alternativ ist eine halbautomatische oder manuelle Auswahl am Bildschirm durch den Bediener möglich.
Vielfältige Vorteile
- Offene Plattform zur Entwicklung eigener Imaging-, Detektions- und Pickingprotokolle
- Vielseitigkeit: Einzelzell-Picking, Isolierung von Clustern, Sphäroiden, Organoiden, adhärenten Kolonien, Einzelzell-Klonen aus einer Vielzahl von flüssigen und halbfesten Medien
- Bis zu 100 % Pick- und Transfereffizienz (je nach Anwendung)
- Extrem schonender Zelltransfer, der zu einer hohen Zellintegrität und zu hohen Auswachsraten nach dem Zelltransfer führt (einschließlich bis zu 95 % Viabilität bei Einzelzell-Klonierungsanwendungen)
- Isolierung von lebenden oder fixierten Zellen
- Vollautomatische oder interaktive Pickmodi mit Live-Visualisierung des Pickvorgangs auf dem Bildschirm
- Hoher Scan- und Pick-Durchsatz, dadurch eine schnelle Bearbeitung der Zellen - Das System ist somit kompatibel zu Einzelzell RNA-Analyseanwendungen oder zur Isolierung lebender Zellen
- Optional ist ein Deck-Tray mit gekühlten Zielpositionen erhältlich, um den RNA-Abbau der isolierten Zellen zu verhindern
- Automatische Einstellung von Pickposition und -höhe
- Validierte Protokolle zur Detektion und Isolierung von Einzelzellen in Suspension, adhärenten Zellen oder Kolonien, 3D-Klonen in flüssigen oder halbfesten Medien etc. für die nachfolgende molekulare Analyse oder Klonierung (z.B. für die Zelllinienentwicklung)
- Kompatibel mit Standard- und kundenspezifischen Zellkulturplatten
- Lückenlose Dokumentation und Rückverfolgbarkeit von der Ausgangsplatte bis zum Zielort einschließlich aller Zelldaten sowie einer Bildaufnahme vor und nach dem Pickprozess für jede isolierte Zelle
- Das hochauflösende Imaging-System kann auch für Bildverarbeitungsanwendungen ohne Zellisolierung eingesetzt werden
- Einfach zu bedienen, erfordert keine hochqualifizierte Bedienung
- Keine Routinewartung notwendig
Schlüsselspezifikationen and Funktionen
- Hellfeld-, Phasenkontrast- und Fluoreszenzaufnahmen in bis zu 7 Kanälen
- Vergrößerungen von 1,25 x bis 60 x für optimale Bildauflösung und Geschwindigkeit
- Automatisierte Bildanalyse, Zell-/Kolonie-Segmentierung und Gating basierend auf der Zellmorphologie und/oder dem Vorhandensein oder Fehlen von Fluoreszenzmarkern
- Verschiedene Bildgalerie-Modi der erkannten Zellen ermöglichen eine einfache und schnelle Überprüfung der Auswahlliste
- Pick-Kapillaren/Spitzen von 20 µm bis 1,2 mm Innendurchmesser, zum Abdecken des gesamten Spektrums an Anwendungsszenarien
- Vom Benutzer anpassbare Pick-Protokolle ermöglichen die Optimierung verschiedener Parameter (z.B. Absaugvolumen und -geschwindigkeiten etc.) für die unterschiedlichen Anwendungen
- Verschiedene applikationsspezifische Pickmethoden: Einzelzellgewinnung, Zellpooling, Erzeugung von Replikatplatten, Zellablage auf dem Mikroskoptisch, serielle Pickmodi für Anreicherungs- und Reinigungsszenarien, interaktive Pick- und Ablagemethoden
- Installation in einer Standard-Biosicherheitswerkbank / Zellkulturhaube oder in unserer ALS Incubator FlowBox
™ , die einen sterilen, laminaren Luftstrom mit Temperatur-, CO2- und Feuchtigkeitsregelung für die Handhabung von empfindlichen Zellen und die Durchführung von Langzeitexperimenten kombiniert (siehe unten)
CellCelector™ Software
Der CellCelector™ wird von einer leistungsstarken und dennoch einfach zu bedienenden Software gesteuert, die den Anwender durch alle Schritte des Workflows führt, einschließlich des Scannens der Platten, der Bildanalyse, der Erkennung und Überprüfung der Zielzellen sowie deren Isolierung und der gesamten Dokumentation. Viele intelligente und einzigartige Funktionen ermöglichen eine robuste und einfache Bedienung.
Austauschbare Erntewerkzeuge
Der CellCelector™ ist das weltweit flexibelste Zellpickingsystem, mit dem es möglich ist, innerhalb von Minuten von der Isolierung seltener Einzelzellen aus Flüssigbiopsien auf das Picken von Klonen aus Methylcellulose zur Erforschung von Antikörpern umzuschalten.
Das Herzstück dieser Flexibilität sind mehrere vom Benutzer austauschbare Pickingmodule, mit denen das System ausgestattet werden kann. Dies ermöglicht einen schnellen und reibungslosen Übergang zwischen verschiedenen Anwendungen. Der CellCelector™ erkennt automatisch das installierte Modul und lädt die entsprechenden Applikationsparameter. Aufgrund seiner Flexibilität kann das System leicht von mehreren Forschungsgruppen gemeinsam genutzt werden und stellt somit ein ideales Werkzeug für gemeinsam genutzte Ressourcen oder zentrale Einrichtungen dar.
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Das Pickmodul für Einzelzellen verwendet flüssigkeitsgefüllte Glaskapillaren für ein schonendes und hochpräzises Aufsaugen von Zellen und Flüssigkeiten mit geringem Volumen. Dieses Modul ist daher ideal für die Isolierung von Einzelzellen und jeder anderen Art von multizellulären Objekten (Cluster, Einzelzellklone, Spheroide, Organoide, embryoid Bodies, Neurosphären etc.) aus einer Mischkultur in flüssigen oder halbfesten Medien geeignet. |
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Das Scrapemodul benutzt wiederverwend- und autoklavierbare Edelstahlkapillaren (Scrapetips™), für ein kreuzkontaminationsfreies Picken adhärenter Kolonien oder Gewebebereiche. Dieses Modul ist perfekt für das klonale Picken von Stammzellkolonien (iPSC, mESC, hESC, hASC und andere) aus flüssigen Medien sowohl von Feederzellen als auch von feederzellfreien Kulturen, sowie für die Erstellung von Replikaplatten und viele weitere Anwendungen geeignet. |
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Das Pickmodul für halbfeste Medien verwendet Einwegpräzisions-plastikspitzen, die bei minimaler Routinewartung effektiv jede Kreuzkontamination verhindern. Das Modul ist ideal für das Picken von Klonen, Kolonien, Spheroiden, großen Organoiden und anderen 3D Objekten aus halbfesten Medien wie Methylzellulose, Matrigel®, Agarose etc. geeignet. |
Zubehör
Der ALS CellCelector™ kann mit Hilfe einer Vielzahl von Adaptern an Ihre aktuellen Verbrauchsmaterialien leicht angepasst werden. Dazu zählen sowohl die Ausgangsplatten (auf dem Mikroskoptisch positioniert) als auch die Zielplatten (auf dem Roboterdeck platziert). Der CellCelector™ benötigt keine teuren, speziellen Verbrauchsmaterialien oder Reagenzien. Sie können weiterhin die Verbrauchsmaterialien verwenden, die Sie zur Erstellung Ihrer Applikation verwendet haben - der CellCelector™ automatisiert diese einfach.
Applikationen
Der CellCelector™ ist eine offene und modulare Plattform, die in vielen verschiedenen Forschungbereichen verwendet werden kann. Bei Bedarf kann das System leicht von mehreren Forschungsgruppen gemeinsam genutzt werden, die zwischen verschiedenen Anwendungen wechseln, z.B.
- Einzelzelldetektion und -isolierung / Einzelzellsortierung (u.a. Gewinnung zirkulierender Tumorzellen (CTCs) oder fetaler Zellen (für zellbasierte, nichtinvasive Pränataltests))
- Einzelzell PCR Analyse und Next generation sequencing
- Einzelzell RNA-Sequenzierung
- Cluster/Spheroid Isolierung mit Heterogenitätsanalyse auf Einzelzellniveau
- Einzelzellklonierung mit integrierter Monoklonalitätsprüfung (eliminiert die Notwendigkeit von Subklonierungsrunden) in der pharmazeutischen Zelllinienentwicklung
- Hochdurchsatz-Screening von B-Zell- und Hybridoma-Klonen für die Entdeckung von Antikörpern
- Klonierung in halbfesten Medien (z.B. Hybridoma-Klone für die Entdeckung von Antikörpern)
- Isolierung von Stammzellkolonien (z.B. klonales Picken von iPSC, hESC etc., schonende Passage neu gewonnener iPS-Zelllinien) von Feederzellen und feederfreien Kulturen
- Einzelstammzellklonierung aus gen-editierten Zellpools (nach CRISPR/Cas9 etc.)
- Picken von embryoid bodies, Neurosphären, RPE Kulturen und anderen differenzierten Zellen
- Zell- und Gentherapieanwendungen mittels hämatopoetischer Stammzellen
- Applikationen aus der regenerativen Medizin
Einhausungen für den CellCelector
Oftmals erfordert die Handhabung von Zellen eine sterile Arbeitsumgebung. Für den ALS CellCelector™ bieten wir verschiedene Gehäusevarianten an, die von einer einfachen PCR-Haube für die Sicherheit des Anwenders bis hin zu unserer anspruchsvollsten Option - der ALS Incubator Flowbox™ - reichen. Die ALS Incubator Flowbox™ bietet sowohl Sterilität als auch eine kontrollierte Zellkulturumgebung für Ihre empfindlichen Zellen und Langzeitexperimente. Natürlich kann der CellCelector™ auch in einem bereits vorhandenen Biosicherheitsschrank oder einer Zellkulturhaube installiert werden (bitte kontaktieren Sie uns für Details).
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Diese von ALS entworfene PCR-Tischhaube schützt das System vor Staub und gewährleistet gleichzeitig die Sicherheit des Benutzers. Dies ist ausreichend, wenn keine Rekultivierung der entnommenen Zellen notwendig ist (z.B. wenn Zellen ausschließlich für nachfolgende molekulare Analysen wie Einzelzell-DNA-, RNA- oder Next-Generation-Sequenzierung isoliert werden). |
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Die von uns angebotene NuAire |
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Die ALS Incubator Flowbox |
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