Arabidopsis Thaliana Einzelzellen
Isolierung von Protoplasten / Pflanzenzellen
Arabidopsis thaliana gehört zur Familie der Brassicaceae (wie Blumenkohl) und ist ein Modellorganismus für die Pflanzenforschung. Da der Raps (Brassica napus) zur gleichen Familie gehört, ist Arabidopsis ein interessantes Modell für die Forschung über regenerative Energien geworden. Der gesamte genetische Code ist bekannt und seine Wachstumseigenschaften erlauben die Untersuchung mehrerer Generationen (Generationszeit etwa 6 Wochen) innerhalb kurzer Zeit.
Pflanzenzellen wurden mit Cellulase behandelt, um die Zellwand zu entfernen. Einzelne Zellen in Puffer wurden auf dem Bildschirm im Phasenkontrast, Hellfeld und Fluoreszenzmodus des ALS CellCelector™ Mikroskops ausgewertet. Fluoreszierende Pflanzenzellen konnten automatisch erkannt werden.
Abb. 1: Detaillierte Abbildung eines Scans. Fluoreszierende Arabidopsis th. Blattzellen neben nicht fluoreszierenden Zellen.
Der ALS CellCelector™ erleichtert die Entnahme einer lebensfähigen und intakten Zelle, was die Voraussetzung für die nachfolgenden Prozesse wie die RNA-Analyse mittels Einzelzell-RT-PCR ist.
Abb. 2: Dokumentation des Pickvorgangs für Protoplasten im Fluoreszenzkanal des CellCelector™. Links: vor dem Picken; rechts: nach dem Picken
Abb. 3: Dokumentation des Pickvorgangs von Protoplasten im Hellfeld. Links: vor dem Picken; rechts: nach dem Picken.
Abb. 4: RT-PCR für gdp2 von Arabidopsis thaliana Blattzellen, isoliert mit dem CellCelector™. Glycindecarboxylase (gdp) ist Teil des Photorespirationszyklus in C4 Pflanzen.
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